點(diǎn)開(kāi)有驚喜
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核酸提取是各種分子生物學(xué)研究中的一項必要技術(shù),核酸提取的主要步驟包括破碎樣本與核酸釋放、核酸分離與純化、核酸沉淀和洗滌。在進(jìn)行這些繁瑣的提取步驟中,操作不謹慎,會(huì )出現核酸(DNA/RNA)濃度低、有雜質(zhì)、核酸降解等問(wèn)題,影響后續的實(shí)驗進(jìn)行。

離心柱法提取核酸流程圖(圖片來(lái)自于網(wǎng)絡(luò ))
為了解決以上問(wèn)題,百邁客生物開(kāi)發(fā)了一種簡(jiǎn)單、快速和高效的動(dòng)物核酸提取試劑盒??梢詮膭?dòng)物組織、細胞、血漿樣本中快速提取總DNA&RNA,適用于后續PCR、 DNA文庫構建、體外翻譯等各種分子實(shí)驗。
Blood/Cell/Tissue DNA Kit
動(dòng)物DNA提取試劑盒
該試劑盒使用硅膠柱純化方式,含特殊的結合液/蛋白酶K,能迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶;可高效清除細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)??梢詮膭?dòng)物組織、細胞、全血樣本中快速提取總DNA。
產(chǎn)品特點(diǎn)
改良配方:含特殊的結合液/蛋白酶K,能迅速裂解細胞和滅活細胞內核酸酶;可高效清除細胞代謝物、蛋白等雜質(zhì)。
特殊純化:使用硅膠柱純化方式,提取過(guò)程中無(wú)需進(jìn)行耗時(shí)的醇類(lèi)沉淀,并去除RNA、雜蛋白、脂類(lèi) 及其他抑制性雜質(zhì)。
適用樣本豐富:適用各種血液、動(dòng)物細胞、動(dòng)物組織。
毒性?。禾崛∵^(guò)程中無(wú)需使用苯酚等有毒試劑。
結果展示
1.DNA濃度/純度檢測:提取不同動(dòng)物組織中的DNA,然后檢測DNA的濃度和吸光度。
結論:Qubit測得的DNA濃度較高;且A260/A280值在1.8~2.5之間,表明提取的DNA純度高。
表1:用Qubit檢測DNA的濃度,以及用Nanodrop檢測DNA在260 nm的吸光度。
2.DNA完整性檢測:提取50?mg不同組織中的DNA,然后凝膠電泳檢測完整性。
結論:條帶明亮清晰無(wú)拖尾現象,表明提取的血液、動(dòng)物組織、細胞的DNA完整性好。
圖1:將提取的DNA每孔上樣300 ng,瓊脂糖濃度為1%,70 V電壓,跑膠45 min。
Lane 1:λ-Hind Ⅲ DNA Marker ;Lane 2:雞血;Lane 3:人血;Lane 4:小鼠胃;Lane 5:
大鼠肺;Lane 6:小鼠脾臟;Lane 7:小鼠肝臟;Lane 8:Marker;Lane 9:果蠅;Lane 10:東亞飛蝗;Lane 11:石斑魚(yú);Lane 12:白條地藤壺;Lane 13:λ-Hind Ⅲ DNA Marker。
Biomarker Cell/Tissue Total RNA Isolation Kit
動(dòng)物RNA提取試劑盒
該試劑盒中的裂解液RLT Plus能迅速裂解細胞和滅活細胞RNA酶的活性;且基因組清除柱能有效分離上清液并去除gDNA。提取的RNA純度高、質(zhì)量穩定。適用于從動(dòng)物組織、細胞、樣本中快速提取總RNA。
產(chǎn)品特點(diǎn)
適用樣本豐富:可快速提取動(dòng)物組織、細胞、昆蟲(chóng)等樣本總RNA。高效基因組DNA柱清除技術(shù):可有效清除電泳可見(jiàn)gDNA殘留,提取的總RNA純度高,沒(méi)有基因組、蛋白和其它雜質(zhì)的污染。RNA純度高:可用于RT-PCR、qPCR、普通轉錄組測序、全長(cháng)轉錄組測序等下游實(shí)驗。
結果展示
1.RNA濃度檢測:Nanodrop檢測A260/A280值在2.0左右,表明提取的RNA純度高,且濃度高。同時(shí)Agilent 2100生物分析儀檢測的RIN值接近10,表明RNA無(wú)降解,完整性好。
2.RNA完整性檢測:通過(guò)凝膠電泳檢測,發(fā)現28S和18S條帶最明亮、清晰、條帶邊緣銳利,且28S條帶的亮度大概是18S條帶的兩倍或者以上,表明提取的RNA的完整性好。
圖2:將提取的RNA每孔上樣200 ng,瓊脂糖濃度為1%,180V電壓,跑膠20 min。
Lane 1:250 bp DNA Marker ;Lane 2:小鼠/子宮;Lane 3:小鼠/肺;Lane 4:小鼠胃;Lane 5:小鼠/心臟;Lane 6:果蠅。
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